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2022-10-08 
灵灵一一、简介
从浆细胞中扩增抗体的H链和L链基因，并构建成文库，抗体片段群与噬菌体衣壳蛋白融合表达并展示于噬菌体表面，形成噬菌体展示抗体库。主要有三种类型: scFv库(由VH和VL组成，并由一个linker连接成一个单链多肽)、Fab库(含有VH-CH1&VL-CL，并由二硫键连接在一起)和VHH库(只有重链可变区针对驼科动物)，针对不同筛选源设计合适的淘选方案，经过3-4轮富集，最终得到阳性克隆，经测序得到抗体序列。
二、相较于传统抗体发现平台噬菌体展示的优势
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技术 |
免疫血清 |
杂交瘤 |
噬菌体展示 |
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抗体类型 |
多克隆抗体 |
单克隆抗体 |
重组抗体 |
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抗体种类 |
/ |
IgG(少数为其它类型) |
IgG，scFv，Fab，VHH等 |
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物种 |
多种动物 |
大鼠小鼠 |
人和各种动物 |
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宿主细胞 |
/ |
杂交瘤 |
细菌/293/CHO |
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筛选范围 |
/ |
≤10^3 |
10^7-10^11 |
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时间 |
几个月 |
几个月 |
几周 |
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操作 |
简单 |
复杂 |
较简单 |
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免疫 |
必须 |
必须 |
非必须 |
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人源抗体 |
/ |
/ |
可以 |
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产量 |
有限 |
有限 |
可通过重组表达实现无限产量 |
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基因获取 |
/ |
再克隆后杂交瘤测序，此过程基因容易丢失 |
直接测序 |
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实验重复性 |
无法重复 |
无法重复 |
有原始库即可重复 |
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发展前景 |
有限 |
有限 |
十分广阔 |
三、物种&抗体介绍
1.The antibody of camelidae
羊驼体内既有单域重链抗体（IgG2b，IgG2c），又有传统抗体IgG1；绝大多数情况下，选择羊驼开发抗体，只关注到单域重链抗体，忽视了IgG1抗体
Alpaca：IgG1a，IgG1b，IgG2b，IgG2C
Llama：IgG1a，IgG1b，IgG2b，IgG2C
Camel：IgG1a，IgG1b，IgG2a，IgG2c，IgG3
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骆驼(camel) |
羊驼(alpaca) |
大羊驼(llama) |
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单域抗体含量 |
单域抗体约70% |
单域抗体约25~45% |
单域抗体25%~45% |
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分子内二硫键 |
分子内二硫键80% |
分子内二硫键35% |
分子内二硫键20% |
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人源化程度 |
65~70% |
80%以上 |
80%以上 |
2.The antibody from shark
IgNAR 的重链含有 1 个可变区和 5 个恒定区, 可变区通过类似铰链区结构与恒定区相连, 一个柔性接头，连接FR2和FR3，且对 CDR1和 CDR3 的支撑作用不明显。
3.The antibody of Human
人体内主要有4种抗体IgM, IgG, IgE, IgA,其中IgD 不能(未被发现)做抗体.
lIgM是初级抗体，负责对新抗原快速普遍的压制，抗原亲和力较低
lIgG是最普遍的血清抗体, 亲和力高功能多，可以激活多重免疫细胞，也可以穿越胎盘保护胎儿
lIgE是寄生虫/过敏原抗体，这里的寄生虫主要指蠕虫/弓形虫等动物
lIgA是粘膜抗体，会穿过粘膜组织保护相关器官，如肺，肠胃等，在乳汁中也常见 用以保护免疫力尚未发育完全的婴儿的健康
四、淼灵优势资源
l有成熟的文库构建体系。可构建scFv库、Fab库、VHH库。
l可根据客户不同要求构建不同类型，不同物种的文库。
l有完善的一套生物淘选的流程。可根据筛选源性质不同设计不同的淘选方案。
l拥有自己的千亿级天然人源重组抗体库（1011）、百亿级天然纳米抗体库（1010）。
五、人源天然库QC鉴定
对构建完成的库中挑选了600多个单克隆进行测序，并分析汇总得到以下结果：
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